Masson染色液是指用兩種或三種陰離子染料混合,膠原纖維呈藍色,肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一。
Masson染色液:
Regaud 氏蘇木精:蘇木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸餾水80ml。
將蘇木精加入蒸餾水內(nèi)加溫溶解,冷卻后加入酒精和甘油,放數(shù)日后即可應(yīng)用。
Masson麗春紅酸性復(fù)紅液: 麗春紅0.7g,酸性復(fù)紅0.3g,蒸餾水99ml,冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液: 冰醋酸0.2 ml,蒸餾水100 ml。
1%磷鉬酸水溶液:磷鉬酸1g,蒸餾水100 ml。
苯胺藍水溶液:苯胺藍2g,蒸餾水98 ml,冰醋酸2 ml。
1%光綠水溶液:光綠 1g,蒸餾水100 ml。
Masson染色液三色法步驟:
1. 石蠟切片脫蠟至水。
2. 鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。
3. 依次自來水和蒸餾水洗。
4. 用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木素染核5-10min。
5. 充分水洗,如過染可鹽酸酒精分化。
6. 蒸餾水洗。
7. 用Masson 麗春紅酸性復(fù)紅液5-10min。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 1%磷鉬酸水溶液分化3-5min。
10. 不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍或光綠液染5min。
11.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12.95%酒精、*、二甲苯透明、中性樹膠封固。
結(jié)果:膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色(如光綠液染色為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)呈紅色,胞核黑藍色。
體會與說明:
1.控制好染色步驟。
2.組織固定起著很重要的作用,根據(jù)不同的固定液可延長或縮短染色時間。
3.0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色調(diào)清晰鮮艷。
4.磷鉬酸水溶液對麗春紅、酸性復(fù)紅有分化作用,分化時鏡下控制, 肌纖維和纖維素呈紅色,膠原纖維呈淡粉紅色即可。
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